খুলনা বিভাগটির আয়তন ২২,২৮৫ বর্গ কিলোমিটার। পৃথিবীর মানচিত্রে খুলনা বিভাগের অবস্থান ২১^০৪০’ উত্তর অক্ষাংশ হতে ২৪০১২ উত্তর অংশে এবং ৮৮^০৩৪’ পূর্ব দ্রাঘিমা হতে ৮৯^০৫৭’ পূর্ব দ্রাঘিমায়। বাংলাদেশের দক্ষিণ-পশ্চিমাঞ্চলে অবস্থিত। খুলনা দশটি জেলার বিভাগীয় সদর দপ্তর। ঢাকা ও চট্টগ্রাম নগরের পরে এটি বাংলাদেশের তৃতীয় বৃহত্তম নগর। খুলনা বাংলাদেশের দক্ষিণ পশ্চিমাঞ্চলে রূপসা, ভৈরব এবং ময়ূর নদীর তীর জুড়ে অবস্থিত। খুলনা বাংলাদেশের অন্যতম শিল্প ও বাণিজ্যিক এলাকা হওয়ায় খুলনাকে শিল্প নগরী হিসেবে ডাকা হয়।